1908年(光緒三十四年)11月14日傍晚被囚禁在瀛台的38歲的光緒帝駕崩；第二天下午，統治中國近半個世紀之久的74歲的慈禧太後也斷了氣。因僅隔一天，其死因引起許多猜測。“清光緒皇帝死因”研究報告會上，頗多爭議的光緒死因疑案，在百年後通過一係列現代專業技術手段得以確證：光緒帝突然“駕崩”係急性胃腸性砒霜中毒所致。
“光緒之死”是上世紀初的重大曆史事件，關於光緒的死因卻眾說紛紜，成為近代史上的一樁謎案。有人認為，慈禧不願意光緒在自己死後重新掌權，派人毒死了光緒。有人說，戊戌變法時袁世凱出賣光緒，怕慈禧死後遭光緒報複，於是賄賂太監下毒。還有說是太監李蓮英下的毒，因為他得悉光緒日記中說慈禧死後將誅袁世凱和他。但也有人認為光緒是身體虛弱病死。
據介紹，光緒帝墳墓(清西陵的崇陵)曾被打開，後來清理封閉，留下若幹頭發、遺骨和衣服等由該處妥善保存。為解開“光緒之死”這一曆史謎案，從2003年開始，中央電視台、清西陵文物管理處、中國原子能科學研究院、北京市公安局法醫檢驗鑒定中心等單位組成了“清光緒帝死因”專題研究課題組。同時，這一研究也被國家清史編纂委員會納入《國家清史纂修工程重大學術問題研究專項課題》。據介紹，在不能開棺直驗且時隔久遠、檢材條件很差等不利因素下，專家們曆時五年，由光緒帝發砷入手，利用“中子活化”、“X射線熒光分析”“原子熒光光度”等一係列現代專業技術手段，通過開展對比、模擬實驗、雙向圖例等工作，對清西陵文物管理處提供的光緒遺體的頭發、遺骨、衣服以及墓內外環境樣品進行了反複的檢測、研究和縝密的分析。
經科學測算，光緒的頭發截段和衣物上含有劇毒的三氧化二砷即砒霜，而其腐敗屍體僅沾染在部分衣物和頭發上的砒霜總量就已高達約201毫克。由國家清史編纂委員會主任戴逸教授等13位專家聯合撰寫的《清光緒帝死因研究工作報告》稱，根據相關研究，常人口服砒霜60至200毫克就會中毒身亡。光緒帝攝入體內的砒霜總量明顯大於致死量。其胃腹部衣物上的砷是其含毒屍體腐敗後直接侵蝕遺留所致，而其衣領部位及頭發上的大量砷，則由其腐敗屍體溢流侵蝕所致。
中央電視台主任編輯鍾裏滿則以光緒帝臨終前參與診治的醫生親筆回憶錄及搜集到的軍機大臣的日記等為依據，進一步確定了光緒帝屬急性胃腸性砒霜中毒而亡這一結論。2008年11月14日是光緒帝去世一百周年，“光緒死因”在此時得以確證，別具曆史意義。但關於毒死光緒的凶手，還尚待進一步研究論證。